Contagem global de Leucócitos

O sangue é diluído com um fluido que cause a hemólise dos eritrócitos, mas que não tenha efeito sobre os leucócitos e core os núcleos pelo azul de metileno ou violeta de genciana.
Líquido de Turk - Composição
Ácido acético – Lisa as hemácias
Azul de Metileno ou Violeta de Genciana – Cora os núcleos dos leucócitos
Diluição
A diluição recomendada é de 1/20. Vàrios livros e técnicas falam para diluir 20μL de sangue em 400μL de líquido, que na verdade dá uma diluição de 1/21 (volume final de 420μL). O fator da diluição será utilizado nos cálculos mais na frente. Para o fator da diluição ser 20, a diluição deveria ser 20μL de sangue em 380μL de líquido (volume final de 400μL). Fica a seu critério.
diluição leucócito liquido de turk
Se ficou confuso na diluição confira esse post: Como fazer e calcular diluições
Contagem
  • Com uma pipeta encher os retículos da câmara de Neubauer, evitando excesso de líquido e bolhas de ar sob a lamínula, aderida firmemente à câmara por compressão daquela sobre esta, cobrindo ambos os retículos.
  • Focalizar a preparação em pequeno aumento no microscópio para localizar o retículo e observar a distribuição uniforme dos leucócitos. Em seguida, observar com aumento de 100x e 400x conforme a necessidade.
  • Fazer a contagem de todos os leucócitos encontrados nos quatro quadrantes da câmara de Neubauer, ou seja, 4 mm². Veja a figura abaixo.
Câmara de Neubauer
Cálculo
 cálculos
Onde:
  • Lc = número de leucócitos contados nos 4 quadrantes;
  • 10 = fator de conversão para μl;
  • 21 = fator de conversão da diluição;
  • 4 = fator de conversão para 1 μl.
A contagem manual é mais utilizada nas faculdades. Dificilmente você irá trabalhar em um lugar onde o hemograma é feito manualmente. Mas como é necessário você saber o procedimento para fazer as provas e tirar boas notas, fiz esse post.
Referência 
Carvalho, W. F. Técnicas Médicas de Hematologia e Imuno-hematologia - 8ª Ed. Coopmed, 2008.
Brunno Câmara Biomédico

Biomédico Residente em Hematologia e Hemoterapia no Hospital das Clínicas - UFG (HC-UFG). Criador e administrador do blog Biomedicina Padrão. Colunista do portal LabNetwork.

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